ПЦР анализ: что это такое?

Анализ методом ПЦР

ПЦР анализ — что это такое? Это метод использует принципы молекулярной биологии. Для исследования материала применяются особые ферменты, которые многократно и быстро копируют ДНК, РНК фрагменты возбудителей болезни. Существует разные виды ПЦР анализа в зависимости от исследуемого материала (кровь, моча, кал и т.д.). После обработки сотрудники лаборатории сравнивают с базой данных полученный результат, выявляют концентрацию, тип возбудителя.

Анализ на ПЦР помещают в специальный амплификатор (прибор), который нагревает и охлаждает пробирки с биоматериалом. Изменения температуры нужны для репликации фрагментов. Точность результата будет зависеть от точности температурного режима. Метод полимеразной цепной реакции помогает выявить:

• инфекционный мононуклеоз;
• ВИЧ;
• цитомегаловирусную инфекцию;
• вирусные гепатиты G, C, B, A;
• инфекции/заболевания, передающиеся половым путем (ИППП/ЗППП): гарднереллез, трихомониаз, уреаплазмоз;
• герпетическую инфекцию;
• онкогенные вирусы;
• листериоз;
• хеликобактерную инфекцию;
• клещевой энцефалит, боррелиоз;
• туберкулез;
• кандидоз.

Крови

На данный момент из-за новизны технологии анализ крови методом ПЦР все еще имеет высокую цену. Для подготовки биоматериала не нужно соблюдать определенные требования. Даже вызванные физическими нагрузками, стрессами, сменой рациона питания изменения состава не влияют на результат исследования. ПЦР анализ крови может испортить только прием антибактериальных средств, поэтому перед сдачей необходимо выдержать паузу между лечением и тестом.

ПЦР исследование крови – самый распространенный вариант диагностики хронических, острых инфекционных патологий при вирусном или атипичном проявлении. Серологические методы исследования имеют определенную трудность при проведении – определение наличия возбудителя проводится по наличию антител в организме человека. Результат мог быть ложноотрицательным, если состояние больного не давало время для их выработки.

Мазка

В сфере гинекологии для исследования наличия инфекционных микроорганизмов используют ПЦР анализ мазка. Работа с материалом проводится по тому же принципу, что и с кровью: многократное увеличение фрагментов ДНК возбудителя, чтобы с легкостью его идентифицировать. Это же помогает обнаружить скрытые инфекции у женщины. Для проведения анализа могут быть взяты разные биологические жидкости: слюна, мокрота, моча, кровь. В гинекологии для точности определения чаще используется мазок со слизистой влагалища из цервикального канала.

Для проведения ПЦР существуют определенные показания. Нередко его нужно сделать, чтобы выявить устойчивый к антибиотикам вид возбудителя. У женщин основными показаниями для диагностики по этому методу выступают:

• беременность, которая протекает тяжело;
• острая фаза ИППП;
• если есть подозрение на переход ИППП в хроническую стадию;
• поиск причин бесплодия.

Кала­

Для выявления инфекции может быть назначен со стороны врача анализ кала на ПЦР. Для того, чтобы получить максимально достоверные результаты после теста, необходимо придерживаться следующих правил перед забором биоматериала:

• за несколько суток прекратить прием слабительных препаратов: масла, свечи;
• исключить медикаменты, которые дают специфическую окраску калу, к примеру, с содержанием железа.

Для забора следует использовать стерильную палочку и контейнер. Чем-либо их дополнительно протирать, ополаскивать не нужно. При сборе материала будьте осторожны, вы не должны задеть рукой внутренние стенки контейнера. Следите, чтобы в кале не было примесей мочи, нельзя использовать дополнительные вспомогательные средства для испражнения (клизма). Собирать материал нужно в день сдачи, хватит 1/3 объема контейнера. Данный метод диагностики имеет следующие преимущества:

1. Анализ способен указывать на ДНК паразита, другие же тесты могут определять только остатки их жизнедеятельности.
2. Высокая точность, будет установлен возбудитель.
3. Ультрачувствительный анализ, который способен выявить даже одну клетку вируса.
4. Результат исследования ПЦР будет готов через 4-5 часов.

Мочи

При необходимости для проведения теста врач может взять для исследования мочу. Высокая точность открывает возможность работать с любой биологической жидкостью, из которой удается извлечь ДНК вируса. Чтобы сдать анализ мочи ПЦР, нужно придерживаться таких ограничений перед забором материала:

• минимум за 1 день до процедуры прекратить половые контакты;
• за 3 недели до сдачи должно быть окончено любое антибактериальное лечение, потому что медикаменты смажут картину;
• сдавать анализ нужно натощак (жидкость тоже запрещена);
• брать нужно первую утреннюю порцию материала.

Как называется анализ на инфекции у женщин

Самыми традиционными методами исследования на различные виды инфекций являются мазки на флору.

Чаще всего их сдают женщины при посещении гинеколога в женской консультации.

Взятый из урогенитального тракта биоматериал на инфекции, исследуется одним из способов.

Женские анализы, которые берут для диагностики на наличие инфекции, могут быть разными.

Проводятся следующие виды исследования биоматериала:

1. Бактериоскопия – урогенитальный мазок изучается под большим увеличением микроскопа на наличие патогенной микрофлоры.
2. Бактериологический посев (культуральный метод). Биоматериал помещается на питательные среды и выдерживается при определенных условиях. При появлении колоний микроорганизмов проводится идентификация возбудителя инфекции при ее наличии.
3. ПЦР. Методика применяется для обнаружения генетического материала возбудителя в исследуемом образце.

Дополнительно берутся соскобы из цервикального канала на наличие онкопатологии.

Если результат показывает наличие атипических клеток, то женщину обследуют на наличие папилломавирусной инфекции (ВПЧ), которая часто является причиной рака шейки матки.

Если обнаружится 16 или 18 тип ВПЧ, то степень развития онкологии очень высокая и будут приняты меры для сведения опасности к минимуму.

В условиях женской консультации при наличии показаний, могут также проводиться исследования на скрытые инфекции.

С этой целью берется кровь из вены для анализа.

Патология подтверждается, если в крови будут обнаружены иммуноглобулины к определенному виду возбудителя.

Чтобы избежать искажения результатов женского мазка, исследование должен проводить квалифицированный специалист.

В чем преимущество данного метода?

Диагностика этим методом позволяет найти возбудителя непосредственно в гене, который содержится в исследуемых материалах. Это самый точный анализ на половые инфекции, скрытые инфекции, различные венерические заболевания.

Отличия ПЦР-диагностики от других методов лабораторного исследования заключаются в следующем:

• метод нацелен на выявление самого возбудителя;
• диагностика методом ПЦР отличается универсальностью: для обнаружения возбудителей нескольких;
• заболеваний достаточно только одного биологического образца больного;
• метод обладает высокой чувствительностью и не сопровождается другими перекрестными реакциями.

Кроме этого, преимуществом ПЦР-диагностики является то, что для анализа пригоден любой биологический материал пациента: кровь, выделения из половых органов, моча, сперма.

Виды методик

В рамках проведения ПЦР диагностики разработаны четыре метода тестирования. Каждый из них имеет свои особенности проведения и назначается, исходя из состояния пациента. Для выбора наилучшего способа необходимо проконсультироваться с врачом.

Качественный способ

Этот метод применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть факт присутствия вируса в организме. Его основной недостаток – невозможность установить штамм ВПЧ (только 14-21 виды). Чаще всего качественный способ используется вместе с другими методами выявления папилломавируса. Результат при этом передается с помощью 2 оценок: «обнаружено» или «не обнаружено». То есть метод либо констатирует факт наличия чужой ДНК, либо показывает ее отсутствие. 

Генотипирование

Методика способна определить как просто наличие вируса в организме, так и установить его вид. Этот способ применяют, когда необходимо установить, осталась ли вирусная ДНК после лечения или случился рецидив вследствие нового заражения. Генотипирование позволяет оценить эффективность проведенного лечения посредством определения вида вируса. Если этот тот же штамм, от которого лечился больной, значит, терапия прошла безуспешно. Если же исследование показывает другой вид ВПЧ, можно говорить о повторном заражении. Результат также представлен формулировками «обнаружено» или «не обнаружено».

Комбинированный метод

Узкоспециализированный способ диагностики, основанный на соединении качественного метода и определения 16 штамма посредством генотипирования. Результат представлен 3 ответами: «не обнаружено», «обнаружен 16 штамм», «обнаружен ВПЧ с 16 типом включительно». Этот метод применяется при подозрении на наличие высокоонкогенного типа папилломавируса, способного вызывать у женщин рак шейки матки.

Количественный метод

Такой способ позволяет установить концентрацию вируса в организме и отследить развитие ВПЧ. Считается наиболее информативным, так как позволяет определить тяжесть протекающего процесса, исходя из которой, подбирается лечение. Основан на определении количества вирусных клеток в рамках исследуемых 100 тысяч. Когда их совокупность превышает 5, это свидетельствует о высокой концентрации папилломавируса, что повышает возможность появления раковых клеток. Если количество клеток меньше 3, концентрация указывается как незначительная.   

Общее описание

Общий (урогенитальный) мазок проводится методом бактериоскопии (исследование под микроскопом). Является самым простым методом определения заболеваний, передающихся половым путем.

Показания к взятию мазка

• наличие выделений из влагалища, указывающих на возможный воспалительный процесс;
• боли внизу живота;
• жжение или зуд во влагалище;
• длительный прием антибиотиков;
• планирование беременности;
• профилактический осмотр.

Отклонение от нормы по результатам общего мазка

• Лейкоциты — повышение их количества в мазке свидетельствует о наличии воспалительного процесса. Во время беременности нормы содержания лейкоцитов в мазке несколько повышаются. Их количество во влагалище может доходить до 20-30 в поле зрения.
• Плоский эпителий — это клетки, выстилающие поверхность слизистой оболочки влагалища и канала шейки матки. Если эпителий не обнаружен вообще, это может свидетельствовать об атрофии эпителиального слоя, тогда как повышение количества клеток плоского эпителия может свидетельствовать о воспалении.
• Слизь — в умеренных количествах содержится в гинекологическом мазке и является нормой, поскольку вырабатывается железами цервикального канала и влагалища.
• Лактобациллы (палочки Додерлейна) — в норме эти палочки присутствуют в большом количестве в микрофлоре влагалища. Снижение их количества свидетельствует о бактериальном вагинозе.
• Дрожжи — в небольшом количестве входят в состав нормальной микрофлоры влагалища, но их повышение (свыше 104 КОЕ/мл), особенно на фоне характерного зуда во влагалище и творожистых выделений, является признаком молочницы.
• «Ключевые» клетки — это клетки плоского эпителия, покрытые бактериями — гарднереллой. Наличие большого их количества в мазке свидетельствует о гарднереллезе.
• Лептотрикс — это анаэробные грамотрицательные бактерии, встречающиеся при смешанных половых инфекциях, таких как кандидоз и бактериальный вагиноз или трихомониаз и хламидиоз.
• Мобилункус — анаэробный микроорганизм, встречающийся у женщин с кандидозом или бактериальным вагинозом.
• Трихомонада — простейший одноклеточный микроорганизм, вызывающий воспалительные процессы в мочеполовой сфере.
• Гонококки (диплококки) — их наличие в мазке является признаком гонореи. В норме их быть не должно.
• Кишечная палочка — в норме присутствует в мазке лишь в небольших количествах. Содержание большого количества кишечной палочки в мазке свидетельствует о бактериальном вагинозе, нарушении правил личной гигиены, попадании в мазок кала.
• Стрептококки, стафилококки, энтерококки — являются условно патогенными микроорганизмами. В небольшом количестве входят в состав нормальной флоры, тогда как увеличение их количества свидетельствует о наличии инфекции.

Степени чистоты влагалища

По данным исследования общего мазка выделяют четыре степени чистоты влагалища:

• 1-я степень: характерна для здоровых женщин. Микрофлора влагалища оптимальна. Данная степень встречается крайне редко.
• 2-я степень: имеются незначительные отклонения микрофлоры. Самая распространенная степень чистоты среди здоровых женщин.
• 3-я степень: в мазке обнаруживаются отклонения от нормы (увеличение количества грибов, рост условно-патогенных бактерий). Данная степень указывает на наличие воспалительного процесса.
• 4-я степень: в мазке определяется значительное отклонение от нормы, что свидетельствует о наличии бактериального вагиноза и других половых инфекций.

Сбор материала для ПЦР анализа

Стандартно выполняются соскобы и мазки у женщин на гинекологическом кресле.

У мужчин при урологическом осмотре.

Чаще всего это все же соскоб эндотелиальных клеток мочевыводящих путей.

При отсутствии воспалительных изменений болей при манипуляции нет.

Воспаленные слизистые более подвержены микротравмам и могут давать незначительные контактные кровотечения.

С ними ничего не нужно делать, проходят самостоятельно за несколько часов или суток.

Для женщин сначала выполняется забор проб из уретры, затем из влагалища и наконец из шеечного канала.

• Цервикальный материал забирается тампоном-щеточкой или стандартным ватным тампоном, с которого пробу переносят в пробирку с транспортной средой.
• Из уретры забор предусмотрен тампоном или бактериологической петлей из пластика.

Они вводятся на пару сантиметров и вынимаются с легким нажимом на стенки уретры.

Полученный образец также переносится в пробирку.

Соскоб из влагалища берется с использованием стерильного ватного тампона. При выборе участков забора образца предпочтение отдается измененной слизистой или заднему своду влагалища.

У мужчин соскоб предполагает использование урологического зонда.

Он вводится в мочеиспускательный канал на глубину 3-4 сантиметра и вынимается с легким нажатием на стенки уретры.
Образцы других биологических жидкостей и тканей берутся в лаборатории или на приеме у профильного специалиста.

• Венозная кровь натощак утром или после шестичасового голодного промежутка в процедурном кабинете.
• Сперма – в лаборатории собирается пациентом.
• Мазки из прямой кишки, ротоглотки, отделяемое конъюнктивы – средним мед персоналом на приеме у врача.
• Простатический секрет – на приеме у уролога после массажа простаты.
• Для мочи предусмотрен сбор утренней порции в объеме 30-50 миллилитров после гигиенического туалета половых органов.
• Мокрота собирается утром после питья небольшого количества теплой жидкости при отхаркивании в стерильную аптечную емкость.
• Спинномозговая жидкость (ликвор) – при проведении пункции.

В каких случаях дают направление

В каких случаях дают направление

Этот вид исследования имеет сверхчувствительность и позволяет быстро получить результаты, что сделало ПЦР в гинекологии неотъемлемой частью диагностики в гинекологии. Врачи-урологи тоже часто прибегают к нему для постановки диагноза у мужчин.

Мазок ПЦР у женщин и мужчин выявляет:

• наличие скрытых инфекций, передаваемых половым путём: хламидиоз, уреаплазмоз, микоплазмоз, трихомониаз, вирус герпеса, в том числе его онкогенные штаммы;
• ВИЧ;
• вирусы гепатита A , B, C, D;
• вирусы краснухи, кори, паротита;
• вирус Эбштейна — Барр и цитомегаловирус;
• вирус папилломы человека;

Направление на обследование врач акушер-гинеколог даёт в следующих ситуациях:

• планирование беременности;
• тяжелое течение беременности, выкидыши в анамнезе
• острая мочеполовая инфекция во время беременности или обострение уже имеющегося хронического заболевания;
• незащищенный половой акт или наличие нескольких половых партнёров в течение последних 36 месяцев;
• при подозрении на наличие ИППП у женщин, когда другие методы обследования никаких патологических изменений не выявили;

Мазок на ДНК-исследование берут из цервикального канала, заднего свода влагалища и уретры специальной щёточкой, которая не травмирует слизистые оболочки

Для получения точного результата важно, на какой день цикла вы пришли сдавать мазок на инфекции. Гинеколог заранее обговаривает, что на момент визита менструальные кровотечения должны закончиться, лучше всего сдавать анализ во второй половине менструального цикла

После забора материала на ИППП у женщин, что в среднем составляет три минуты, весь собранный материал переносится в пробирку и помещается в специальный аппарат (амплификатор). Суть его работы состоит в нахождении участков генетического кода патологического агента и их копировании, дальнейшей идентификации, обработке информации и выдаче уже готовых результатов. Стоит отметить, что ещё один из плюсов — это возможность комплексной диагностики: при проведении теста может быть обнаружено несколько патологических агентов.

Какие половые инфекции выявляет ПЦР анализ

Метод ПЦР расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Это такой анализ, который обнаруживает РНК или ДНК возбудителя инфекционной болезни в исследуемом материале — слюне, крови, выделениях из половых путей. Метод точный, поскольку генетический материал микробов может выявиться только в том случае, если эти микробы есть в организме.

С помощью ПЦР обнаруживают половые инфекции:

• хламидиоз;
• микоплазмоз;
• папилломавирусную инфекцию;
• генитальный герпес;
• цитомегаловирусную инфекцию.

Бактериальные ИППП можно выявить и с помощью обычного мазка при микроскопии или посеве. Вирусы под микроскопом не найти. В этих случаях на помощь приходит ПЦР.

Какие материалы можно использовать для ПЦР

Часто удачность исследования зависит от того, как и какой материал брался для выполнения анализа. Однако в случае с полимеразной цепной реакцией расшифровка результатов ПЦР исследований мало зависит от биологического материала, который брался у пациента. Гораздо большее значение имеет подготовка к обследованию с помощью метода.

В качестве материала могут служить:

• кровь, сдаваемая в соответствии со стандартными рекомендациями из вены на локтевом сгибе
• мокрота, собираемая при откашливании
• налет с ротовой полости, собираемый доктором в утреннее время, пока пациент еще не завтракал и не чистил зубы
• мазок с половых органов, дающий хорошие результаты в том случае, если больной не мочился в течение нескольких часов, отказывался от сексуальных контактов несколько дней и соблюдал ряд других рекомендаций
• исследование мочи, при котором биоматериал также предпочтительно собирать с утра, не проводя накануне гигиену половых органов
• биоптаты органов или тканей, получаемые с помощью специальных инструментов и др.

Как отмечают врачи, материалом для ПЦР может быть совершенно любая жидкая среда организма человека.

При выборе главное помнить о том, что предпочтение отдают той среде, где с большей долей вероятности будет присутствовать возбудитель. Например, при половых инфекциях целесообразнее брать мазок с половых органов или кровь, чем мазок из ротовой полости.

Решать вопрос о том, какие материалы используются для получения результатов ПЦР в том или ином случае, лучше всего с лечащим врачом на приеме. Доктор сделает оптимальный выбор, исходя из предполагаемого у пациента заболевания.

Правила забора материала для исследования

Если необходимо определить инфекции, передающиеся половым путём, тогда берут мазок на ИППП методом ПЦР, то есть используют соскоб с шейки матки, из уретры. Кроме этого, собирают выделения из полового члена у мужчин и влагалища у женщин.

Взятие мазка — один из способов диагностики

В случае, когда необходимо обследоваться на инфекции, например, гепатиты С и В, ВИЧ, мононуклеоз, вирус герпеса, токсоплазмоз и ЦМВИ, тогда берут кровь на ПЦР.

Нередко, когда с целью выявления ЦМВИ, необходимо сдать анализ мочи. А дабы определить вирус герпеса или инфекционный мононуклеоз, используют мазок из зева.

Намного реже в качестве исходного материала используется спинномозговая жидкость. Обычно это необходимо при поражении ЦНС человека.

Если говорить о внутриутробных инфекциях, то для их выявления используют ткань плаценты или околоплодные воды.

В пульмонологии исходным материалом является плевральная жидкость либо мокрота.

Нужно сказать, что в качестве материала, используемого для исследования, может использоваться как жидкость человека, так и биологическая среда. Речь идёт о моче, мокроте, крови, соке простаты, плевральной жидкости, слизи и т.д.

Как подготовиться к проведению диагностики

Несмотря на то что взятый на анализ мазок ПЦР будет исследован в самое ближайшее время, а пациенту выданы его результаты, некоторые люди переживают относительно точности анализа. Конечно, многое зависит от доктора, который берёт забор материала, приборов, но отчасти на процесс влияет и сам пациент. Каждый, кто имеет факторы риска способствующие инфекционным заболеваниям,  должен знать, как сдавать ПЦР на ИППП и другие дисфункции организма правильно.

Только врач может определить серию необходимой диагностики.

Чтобы не было никаких сомнений в результате анализа, следует выполнять следующие правила:

• Если сдаётся ПЦР на венерические заболевания, то нельзя заниматься любовью без барьерных контрацептивов.
• При сдаче крови на ИППП и другие инфекции это делается исключительно натощак. Ни о каком утреннем чаепитии и завтраке не может быть и речи.
• При сдаче мочи забирается только первая утренняя жидкость в чистую ёмкость.

Взятие гинекологического мазка

Гинекологический мазок берут для оценки состояния половых путей женщины. Анализ клеток из влагалища и цервикального канала помогает выявить хронические воспаления, половые инфекции, обнаружить развитие женской онкологии на ранних стадиях.

В профилактических целях мазки берут ежегодно у всех женщин репродуктивного возраста. Внеочередной забор материала может понадобиться при:

• подготовке к беременности или процедуре ЭКО;
• появлении тревожных симптомов – зуд, жжение, высыпания, бородавки в интимной зоне, нарушение менструального цикла;
• после полового контакта с новым партнером (без барьерной контрацепции);
• при частых абортах и неоднократных выкидышах;
• после длительной терапии гормонами или антибиотиками.

Нерегулярный цикл

Случайные связи

Терапия гормонами

Женщинам с отягощенной наследственностью мазок из шейки матки и влагалища рекомендуют сдавать 2 раза в год. Взятие мазка из половых путей женщин проводит гинеколог во время осмотра пациентки на кресле. Врач собирает биоматериал из влагалища, наружного зева матки и канала шейки матки.

Гинекологический мазок на флору

Материал помогает оценить степень микробной чистоты влагалища. Взятие мазков на флору – безболезненная процедура. Однако результаты этого анализа дают врачу важную информацию о состоянии естественной микрофлоры и заражении патогенными микроорганизмами.

Исследование позволяет диагностировать такие патологии:

• вагинит;
• гонорея;
• кандидоз;
• трихомониаз;
• цервицит и другие болезни, вызванные патогенной флорой.

Для анализа состава микрофлоры применяют метод микроскопии с окрашиванием по Граму. Методика основана на способности бактериальной клетки по-разному реагировать на контакт с анилиновыми красителями:

• Грамположительные бактерии – окрашиваются в синий (фиолетовый) цвет. Эти микроорганизмы отличаются простым строением, а их клеточная оболочка очень чувствительная к воздействию антибактериальных препаратов.  
• Грамотрицательные бактерии – при воздействии красителя обесцвечиваются. Их клеточная стенка имеет сложное строение. Это позволяет им сохранять устойчивость к большинству антибиотиков. Именно грамотрицательные бактерии чаще всего вызывают патологии женской половой системы.   

После окрашивания по Граму и исследования материала под микроскопом, используют метод бактериологического посева клеток на питательную среду. Оказавшись в благоприятных условиях микроорганизмы начинают активно расти, образуя колонии. Эти колонии идентифицируют, после чего испытывают на чувствительность к антибиотикам

Это важно для назначения эффективного лечения

Взятие мазка на чистоту влагалища точно определяет возбудителя болезни и оценивает его чувствительность к антибактериальным препаратам разных групп.

Мазок на скрытые инфекции

Ряд заболеваний половой системы протекают без симптомов и могут никак не проявлять себя на протяжении многих лет. При этом они нарушают половую и репродуктивную функцию, вызывают бесплодие, нарушают развитие плода во время беременности.

К скрытым инфекциям относят:

• гонорею;
• сифилис;
• генитальный герпес;
• вирус папилломы человека;
• уреаплазмоз;
• хламидиоз.

После взятия мазка на скрытые инфекции, материал направляют в лабораторию для проведения ПЦР-диагностики. Техника позволяет точно определить специфические ДНК молекулы патогенных микроорганизмов. Методика очень точная и чувствительная. Даже одна микробная клетка в образце может быть выявлена во время анализа.  

Взятие мазка на онкоцитологию

Это анализ клеточной структуры тканей половых органов. Взятие мазка из цервикального канала проводят при подозрении на дисплазию эпителия и онкологию. Это наиболее эффективный способ ранней диагностики злокачественных опухолей. Забор мазка из цервикального канала также информативен при хроническом воспалении и половых инфекциях.

В лаборатории мазок на онкоцитологию окрашивают и исследуют под мощным микроскопом для выявления аномалий и дефектов строения клеток. По результатам взятия мазков на цитологическое исследование пациентка получает один из пяти типов цитограмм:

• 1 класс – атипичные клетки отсутствуют (норма);
• 2 класс – выявлены воспалительные изменения структуры клеток;
• 3 класс – имеются выраженные признаки дисплазии ткани;
• 4 класс – подозрения на рак и эрозию шейки матки;
• 5 класс – онкологический процесс.

Суть метода ПЦР

ПЦР-методика – исследование, используемое довольно широко в современном мире. Диагностика позволяет поставить диагноз не только при инфекционных процессах, но и при генетических патологиях, некоторых онкологических недугах. Изначально ПЦР изобреталась не для применения в медицине.

В отрасль здравоохранения метод пришел из области молекулярной биологии, в которой активно использовался после своего открытия. Ученый, создавший ПЦР, получил нобелевскую премию.

Прежде чем разбираться, как расшифровывать результаты анализов ПЦР, необходимо понять, в чем основная суть методики.

На самом деле на словах все выглядит довольно просто. У пациента берется биологический материал. Затем он обрабатывается особым образом с помощью специальных химических реагентов.

Затем получившуюся смесь помещают в особую машину, которая проводит процесс амплификации. То есть многократного умножения определенных фрагментов ДНК или РНК, что удалось выявить с помощью добавления реагентов.

Когда процесс амплификации подойдет к концу, доктору остается только идентифицировать полученные результаты, чтобы поставить верный диагноз.

Главное – проявить внимательность на этапе идентификации. Но учитывая, что сегодня большую часть работы делает компьютер, все сильно упрощается.

ПЦР отличается высокой эффективностью. Ее широко применяют для того, чтобы определять наличие в организме скрытых инфекционных процессов, которые не дают положительных серологических реакций. Также скрытые инфекции обычно нельзя выявить с помощью посева или микроскопии. Поэтому зачастую ПЦР – единственный достоверный способ постановки диагноза в этом случае.

Мазок на флору у женщин

Этот метод диагностики является одним из самых распространенных при определении в биоматериале половой инфекции.

Мазки берутся как во время осмотра женщины гинекологом в женской консультации или при посещении смотрового кабинета в поликлинике, так и при профосмотрах на предприятиях.

Анализ выделений на флору относится к недорогим видам обследования.

Мазок является эффективным методом выявления половых инфекций, к тому же отлично подходит для массовой диагностики инфекционных заболеваний у женщин.

Забор биоматериала делается из уретры, цервикального канала и влагалища.

Женский мазок исследуется в условиях лаборатории под микроскопом.

Исследование может показать наличие воспалительной реакции, а также патогенную микрофлору, содержащуюся в образце исследуемого биоматериала: гонококковую инфекцию, трихомонады, наличие дрожжевых грибков.

Мазок ПЦР после лечения

Лабораторный тест проводят для контроля излеченности пациента.

После прохождения курса терапии симптомы, как правило, уходят.

Но это не означает, что человек здоров.

Потому что клинические проявления исчезают не только при элиминации возбудителя, но и при значительном уменьшении количества бактерий или других микроорганизмов в урогенитальном тракте.

Поэтому после курса терапии требуется ПЦР.

Отсутствие адекватного контроля излеченности может привести к тому, что инфекция вернется.

Более того: приобретет устойчивость к антибиотикам.

Контрольные анализы сдаются через 2-4 недели после завершения курса терапии.

В большинстве случаев однократного исследования достаточно для подтверждения излеченности.

Разновидности ПЦР-анализов

Вариаций такой ПЦР диагностики существует много. Выбор определенного метода зависит от многих факторов: предположительного диагноза, возможностей доступных лабораторий, метода взятия материала и пр.

Наиболее часто используются такие разновидности ПЦР:

• вложенная;
• ступенчатая;
• с горячим стартом;
• виртуальная;
• ассиметричная;
• в реальном времени и т. д.

Преимущественно используют ПЦР в реальном времени, так как способ характеризуется самыми точными результатами и максимальной скоростью обработки данных. После его применения заключение готово через час-два.

Если врач выдает направление на обследование с применением полимеразной цепной реакции, то он должен уточнить, какой именно биоматериал необходимо предоставить пациенту и каким образом подготовиться к отбору пробы.

Анализ крови

Кровь в качестве биоматериала для тестирования берут при подозрении на ВИЧ, вирусный гепатит, токсоплазмы, половой герпес и цитомегалию. Для большинства этих патогенов до использования этого метода диагностика базировалась на выявлении антител к возбудителю, что сильно затягивало время обнаружения микробов в тот период, когда антитела еще не вырабатываются.

Перед сдачей крови для диагностики в данном случае не нужны особые приготовления, но лучше, если проба будет отобрана натощак. Единственное обстоятельство, способное серьезно исказить результаты — прием антибиотиков, поэтому сдаче должен предшествовать временной отрезок после приема подобных лекарств в несколько дней или недель в зависимости от типа антибиотика.

В самых современных клиниках в последнее время для отбора крови на ПЦР используют вакуумные системы, которые минимально повреждают кожные покровы и сводят к минимуму вероятность попадания в пробу загрязняющих агентов из воздуха, инструментов или рук лаборантов.

Анализ мазка

Используется как в гинекологии, так и в венерологии для определения заболеваний, передающихся половым путем. Часто назначают ПЦР мазка во время беременности для выявления скрытых факторов, способных негативно повлиять на формирование плода или ход беременности.

Подготовка к отбору материала заключается в том, чтобы полностью исключить половые контакты за несколько суток до процедуры. Проводить спринцевания марганцовкой или настоями трав тоже нельзя. На протяжении критических дней и 2-х дней после них мазок на ПЦР-анализ не берется.

Отбор биоматериала производят в лаборатории из влагалища, шейки матки, цервикального канала или уретры.

ПЦР-анализ мазка позволяет выявить патоген, который устойчив к определенному виду антибиотиков. Кроме того, показаниями к такому виду диагностического обследования выступают:

• осложненная беременность без видимых причин;
• острое течение венерической болезни;
• предположительное хроническое течение венерического заболевания;
• выявление причин бесплодия или самопроизвольных абортов.

Анализ кала

Анализ кала с применением полимеразной цепной реакции назначается специалистом для уточнения наличия инфекции. Подготовка к отбору пробы кала для ПЦР заключается в следующем:

• исключить за несколько суток слабительные средства в виде любых свечей, масел или оральных медикаментов;
• не употреблять накануне лекарства или продукты, которые придают калу выраженную окраску.

Материал для ПЦР-определения лучше всего доставить в специальном контейнере для кала с палочкой. Внутреннее пространство контейнера стерильно, поэтому протирать или промывать его не следует

Во время отбора образца важно отслеживать, чтобы не задеть внутреннюю поверхность приемника, также в пробе не должно быть следов мочи. Перед отбором запрещено применение клизм

Анализ мочи

Такое исследование с помощью ПЦР позволяет извлечь ДНК образец вируса или бактерии. Забор мочи лучше проводить утром натощак. Лучше всего, если это будет происходить непосредственно в лаборатории.

Обязательные условия подготовки для получения результатов исследования мочи в лаборатории полимеразной цепной реакции:

• выдержать 3 недели после приема антибиотиков;
• перед отбором жидкости не пить и не есть;
• запрет вагинального секса за сутки до сдачи пробы;
• в контейнер нужно поместить первую порцию материала после пробуждения.

На какие инфекции берут мазок на ПЦР?

Наиболее информативным является мазок ПЦР при исследовании на:

• гонорею
• трихомониаз
• хламидиоз
• герпес
• микоплазмы
• уреаплазмы
• гарднереллы
• папилломавирус

Чаще всего проводят обследование на все инфекции сразу.

В том числе в ситуации, когда:

• у человека уже выявлен в урогенитальном тракте возбудитель (например, в ходе микроскопического исследования мазка определен гонококк);
• известен диагноз у источника инфекции.

Наличие одного возбудителя не исключает присутствие в урогенитальном тракте другого.

У многих пациентов выявляют 2 и более инфекции сразу.

Недообследованность – одна из наиболее частых причин неудач в лечении, когда после этиологического, лабораторно подтвержденного выздоровления не наступает выздоровление клиническое.

Симптомы сохраняются, потому что у человека не выявлен другой возбудитель ЗППП.

В итоге диагностику и лечение нужно проходить заново.

Чтобы этого не случилось, лучше сразу обследоваться на все ЗППП.